在進(jìn)行
小容量搖瓶機試驗前,首先檢查小容量搖瓶機各部件,檢查氣源、電源、管路、壓力表、密封等是否正常,要求實(shí)驗人員在操作前必須對小容量搖瓶機的各個(gè)按鈕,流程熟練掌握,詳細閱讀搖瓶機說(shuō)明書(shū),及實(shí)驗室儀器安全操作規程。掌握了小容量搖瓶機的基本操作要領(lǐng)后,逐步按以下步驟進(jìn)行搖瓶機細菌培養試驗:
1、小容量搖瓶機復蘇:
根據所培養的細菌選擇適宜的培養基,大部分細菌在LB培養基中在超凈工作臺先用1毫升左右的適宜的培養基溶解冷凍菌,然后轉移到10毫升中試管(放入4毫升液體培養基)中,一般在37攝氏度搖床靜止或低轉速培養12小時(shí)或者過(guò)夜(溫度取決于所培養的細菌適宜生長(cháng)的溫度)。
2、搖瓶機平板劃線(xiàn)培養:
在平板(瓊脂+液體培養基)劃線(xiàn),放37攝氏度培養箱培養箱中倒置培養6小時(shí)~12小時(shí),在平板上觀(guān)察是否形成了單菌落。
3、小容量搖瓶機挑單菌落:
在超凈臺中挑選典型單菌落,置入10毫升中試管(內有5毫升液體培養基)中,在37攝氏度搖床,轉速200轉培養12小時(shí)或者過(guò)夜,肉眼能看到試管渾濁。
4、小容量搖瓶機按照1:20的比例將中試管中的菌液移到250毫升三角瓶(放入100毫升液體培養基),培養條件同前。注意:所有的接種操作均需要在層流罩中,培養基應無(wú)菌。